Réamhrá le Prionsabal agus Feidhm Comhpháirteanna Ginearálta Speictrophotiméadar

Úsáidtear speictrophotiméadar go forleathan i dtaighde bitheolaíoch, ceimiceach, cliniciúil agus comhshaoil.
Tomhaiseann speictrophotiméadracht an méid solais is féidir le ceimiceán a ionsú trí bhíoma solais a rith trí shampla i speictrophotiméadar.
Trí dhéine an tsolais bhraite a thomhas, is féidir an modh a úsáid chun tiúchan an tuaslagáin sa sampla a fháil amach.
An coincheap de Speictrophotometry
Is éard atá sa bhíoma a chuirtear chuig an sampla bhíoma fótóin.
Nuair a chomhlíonann na fótóin na móilíní sa sampla, is féidir leis na móilíní cuid acu a ionsú, líon na bhfótón sa bhíoma a laghdú agus déine na comhartha braite a laghdú.
Tá an tarchuradóireacht mar chuid den solas a théann tríd an sampla. Sainmhínítear é mar an déine solais a théann tríd an sampla ag déine solais an teagmhais.
Tá an t-ionsúiteacht os coinne an tarchuradóireachta, a fhreagraíonn don mhéid a thomhaiseann an speictrophotiméadar.
De réir an ionsúcháin, is féidir tiúchan an tsampla tuaslagáin a chinneadh ó dhlí an bhille Lambert, a thaispeánann go bhfuil gaol líneach idir an ionsúiteacht agus tiúchan an tsampla. De réir dhlí beorach Lambert, is é an ionsúiteacht táirge an chomhéifeacht ionsúcháin, ar tomhas é ar mhéid an tsolais a ghlacann tuaslagán ag tonnfhad ar leith agus an fad a théann solas tríd. Sampla, nó fad taistil, agus tiúchan tuaslagtha. Go ginearálta, is é an aidhm ionsúiteacht a thomhas tiúchan an tsampla a thomhas.
Comhpháirteanna speictrophotiméadar
Is éard atá i ngach speictrophotiméadar foinse solais, imbhuailteoir (lionsa nó feiste fócasaithe chun bíomaí láidre agus díreacha a tharchur), monacrómóir chun bíomaí tonnfhaid éagsúla a scaradh, agus roghnóir faid chun tonn nó groove an tonnfhaid inmhianaithe a roghnú. Tá tonnfhad an tsolais a úsáidtear sa speictrophotiméadar a chuirtear i láthair san fhíseán seo i raon an tsolais ultraivialait agus infheicthe. Cuimsíonn an speictrophotiméadar sealbhóir samplach, fótaileastóir agus scáileán a thaispeánann torthaí an bhrathadóra.
Tá an speictrophotiméadar is déanaí cúpláilte go díreach le ríomhaire, áit ar féidir paraiméadair turgnamhacha a rialú agus na torthaí a thaispeáint.
Prionsabal oibre an speictrophotiméadar
Agus speictrophotiméadracht á déanamh agat, tá sé tábhachtach réamhchúraimí iomchuí a dhéanamh, mar lámhainní a chaitheamh, ag brath ar an gcineál tuaslagáin bhitheolaíoch nó cheimiceach a úsáideann tú.
Cas air an bhfeiste agus lig don lampa agus don leictreonaic teas sula ndéantar speictream UV-Vis an tsampla a thomhas.
Ullmhaigh sampla bán den tuaslagán céanna leis an pH céanna agus an neart ianach den chineál céanna, ach gan na comhpháirteanna a anailísiú; ós rud é gur féidir leis an cuvette agus an tuaslagóir solas a scaipeadh, is gá an sampla a anailísiú.
Tá an sealbhóir samplach speictrophotiméadar traidisiúnta deartha chun babhlaí plaisteacha agus grianchloch a shealbhú. Pipéad an tuaslagán bunaidh i mbabhla.
Tar éis aon mhéarloirg a scriosadh agus iad a spalpadh ar an taobh amuigh den bhabhla, cuir an cuvette i gceart i sealbhóir an tsampla agus dún doras an chlúdaigh.
Ná déan dearmad an doras a dhúnadh riamh mar is féidir le radaíocht UV ó speictrophotiméadar oscailte dochar a dhéanamh do do shúile agus do chraiceann.
Cláraigh an tonnfhad nó an tonnfhad atá ag teastáil a tharchuirfear chuig an sampla. Braitheann sé seo ar an tonnfhad is fearr is féidir leis an gcomhpháirt atá á anailísiú a ionsú. Ansin déantar an meaisín a nialasú tríd an sampla bán a thomhas, a dhealraíonn an ionsúiteacht bun mar gheall ar an maolán samplach.
Ag brath ar an gcineál turgnaimh speictrophotiméadracht atá á dhéanamh agat, b’fhéidir go mbeidh sé riachtanach cuar caighdeánach a ghiniúint sula dtomhaisfear an sampla, as ar féidir tiúchan an chomhdhúil a ndéantar anailís air sa sampla a chinneadh.
Lig don sampla an teocht cheart a bhaint amach agus measc go réidh chun boilgeoga a thabhairt isteach. Is féidir an sampla a chur go díreach leis an mbabhla taobh istigh den mheaisín agus is féidir léamh a dhéanamh.
Tar éis an sampla a thomhas le haghaidh ionsúcháin, ríomhtar an turgnamh i gceart; mar shampla, an tiúchan nó leibhéal gníomhaíochta einsím a chinneadh.
Speictrophotiméadar a chur i bhfeidhm
Ceann de na húsáidí coitianta a bhaineann le speictreafótaiméadar is ea dlús cille a thomhas. Is féidir tomhas dlús cille a úsáid chun cuar fáis logartamach na mbaictéar a tháirgeadh, as ar féidir an t-am is fearr le haghaidh comhtháthú próitéin athchuingreach a chinneadh.
Is féidir an speictrophotiméadar a úsáid freisin chun an ráta imoibriúcháin cheimiceach a thomhas. San ionchorprú seo, úsáidtear an t-ionsúiteacht chun monatóireacht a dhéanamh ar an imoibriú einsímeach, a imíonn le himeacht ama trí imoibriú idirmheánach 452nm. Is féidir ráta na céime einsímeacha seo a ríomh trí na sonraí a mheaitseáil leis an gcothromóid chuí.
Cuireann tabhairt isteach micrea-speictreafótaiméadar deireadh le riachtanas shealbhóir an tsampla. Úsáideann na speictrophotiméadair seo teannas dromchla chun an sampla a chothabháil.
Is é micreictreafótaiméadar an rogha is fearr chun mais agus tiúchan samplaí beaga agus costasacha a thomhas, mar shampla bithmhóilíní, lena n-áirítear próitéiní agus aigéid núicléacha.
Braitheann ionsúiteacht próitéiní ag 280nm ar ábhar na slabhraí taobh aramatacha atá le fáil i tryptoffan, tyrosine agus feiniolalainín, chomh maith leis an mbanna déshuilfíde idir an dá chistéin.
Is féidir tiúchan an phróitéin a chinneadh trína ionsúiteacht ag 280nm agus a chomhéifeacht ionsúcháin, atá bunaithe ar chomhdhéanamh aimínaigéid.
Tá an ionsúiteacht uasta ag DNA agus RNA ag 260nm, ónar féidir a dtiúchan a chinneadh. Is féidir íonacht aigéid núicléacha a mheas freisin ón gcóimheas idir léamha ionsúcháin agus tonnfhaid ar leith.