Is gnáth-ionstraimí i saotharlanna bitheolaíochta móilíneacha nua-aimseartha iad spectrophotometers. Is minic a úsáidtear é le haghaidh aigéad núicléasaigh, cainníochtú próitéine agus cainníochtú tiúchan fáis baictéarach.
Prionsabal simplí de speictreafóiméadar
Baineann an speictreafóiméadar úsáid as foinse solais a fhéadann tonnfhaid iomadúla a ghiniúint, agus a théann trí shraith d'fheistí speictreascópacha chun foinse solais de thonnfhad sonrach a ghiniúint. Tar éis don fhoinse solais dul tríd an sampla le tástáil, déantar cuid den fhoinse solais a ionsú, agus ríomhtar ionsúiteacht an tsampla, agus mar sin téann sé go tiúchan samplach. . Tá ionsúiteacht an tsampla i gcomhréir le tiúchan an tsampla.
Cainníochtú aigéad núicléasach
Is é cainníochtú aigéad núicléach an fheidhm is coitianta a úsáidtear sa speictreafóiméadar. Is féidir oligonucleotides, DNA aon-shnáithe, déshnáithe, agus RNA a chainníochtú i maolán. Is é 260 nm buaic ionsúcháin an bhuaic ionsúcháin is airde d'aigéad núicléasach. Tá comhdhéanamh móilíneach gach aigéid núicléasaigh difriúil, mar sin tá na fachtóirí tiontaithe difriúil. Chun cineálacha éagsúla aigéid núicléacha a chainníochtú, roghnaigh na comhéifeachtaí comhfhreagracha roimh ré. Mar shampla, is ionann ionsúlacht 1 OD agus 50 μg / ml dsDNA, 37 μg / ml ssDNA, 40 μg / ml RNA, agus 30 μg / ml Olig. Déantar an t-ionsúiteacht tar éis na tástála a thiontú ag na comhéifeachtaí thuas chun an comhchruinniú samplach comhfhreagrach a fháil. Roimh thástáil, roghnaigh an nós imeachta ceart, breac isteach toirt an tuaslagáin stoic agus an caolaitheoir, agus ansin tástáil an tuaslagán bán agus sampla. Mar sin féin, ní raibh an turgnamh réidh i gcónaí. Is féidir go mbeidh léamha éagobhsaí an tinneas cinn is mó don turgnamh. Taispeánann uirlisí le híogaireacht níos airde sruth níos mó in ionsúlacht.
Go deimhin, ceadaíonn prionsabal dearaidh agus prionsabal oibre an speictreafótair an t-ionsúchán a athrú laistigh de raon áirithe, is é sin, tá cruinneas agus beachtas áirithe ag an ionstraim. Mar shampla, is é cruinneas an Biophotometer Eppendorf ná ≤1.0% (1A). Athraíonn torthaí na dtrialacha éagsúla sin idir thart ar 1.0% den mheán agus is gnáth iad. Ina theannta sin, is gá freisin airíonna fisiciceimiceacha an aigéid núicléasaigh féin agus pH an mhaoláin ina ndéantar an t-aigéad núicléasach a thuaslagadh, an tiúchan ian, srl. A mheas: Nuair a bhíonn an tiúchan ian ró-ard le linn na tástála, léimh léitheoireachta, mar sin moltar luach áirithe pH agus tiúchan ian íseal a úsáid. Déanann maoláin, amhail TE, léamha a chobhsú go mór. Is fachtóir é tiúchan caolaithe an tsampla freisin nach féidir neamhaird a dhéanamh air: mar gheall ar láithreacht dhosheachanta roinnt cáithníní mín, go háirithe samplaí d'aigéid núicléasacha, sa sampla. Cuireann láithreacht na gcáithníní beaga seo isteach ar thorthaí na tástála. D'fhonn éifeacht na gcáithníní ar thorthaí na dtástálacha a íoslaghdú, tá sé riachtanach go mbeidh ionsúiteacht an aigéid núicléasaigh níos mó ná 0.1 A ar a laghad, agus b'fhearr an t-ionsúiteacht idir 0.1 agus 1.5 A. B'fhearr an trasnaíocht seo a dhéanamh. tá cáithníní measartha beag agus tá an toradh seasmhach.
Ciallaíonn sé seo nár chóir go mbeadh tiúchan an tsampla ró-íseal nó ró-ard (thar raon tástála an fhótaiméadair). Ar deireadh, ba chóir go mbeadh na fachtóirí oibriúcháin, amhail meascadh, leordhóthanach, nó go bhfuil an luach ionsúite ró-íseal, fiú luachanna diúltacha; ní féidir leis an meascán boilgeoga a bheith ann, níl aon ábhar ar fuaidreamh ag an leacht bán, nó bíonn an léitheoireacht ag dréim go suntasach; ní mór an cuvette céanna a úsáid chun an bán agus an sampla a thástáil Seachas sin, tá an difríocht i dtiúchan rómhór; roghnaítear an fachtóir tiontaithe agus an t-aonad comhchruinnithe samplacha go comhsheasmhach; ní féidir an cuvette le caitheamh fuinneoige a úsáid; ní mór méid an tsampla an méid íosta a theastaíonn ón cuvette a bhaint amach.
Chomh maith leis an tiúchan aigéid núicléasaigh, taispeánann an speictreafóiméadar roinnt cóimheasa an-tábhachtach a léiríonn íonacht an tsampla, amhail cóimheas A 260 / A 280, a úsáidtear chun íonacht an tsampla a mheas toisc go bhfuil buaic ionsúcháin na próitéine 280 nm. Sampla íon le cóimheas níos mó ná 1.8 (DNA) nó 2.0 (RNA). Má tá an cóimheas níos ísle ná 1.8 nó 2.0, léiríonn sé go bhfuil substaintí próitéine nó feanólacha ann. Tugann A 230 le fios go bhfuil roinnt ábhar salaithe sa sampla, amhail carbaihiodráití, peiptídí, feanóil, etc., agus go bhfuil cóimheas an aigéid núicléigh ghéara A 260 / A 230 níos mó ná 2.0. Aimsíonn A 320 moirtiúlacht an tuaslagáin agus tosca cur isteach eile. I gcás samplaí íon, is iondúil go bhfuil A 320 0.
Co Ionstraim Hangzhou Sumer, Ltd
Cuir: No.168 Wuchang Ave., Dúiche Yuhang, Hangzhou 310023, an tSín
TEL: + 86-571-88739859
Fón: +8618658504900
R-phost: info@sumerlab.com
Gréasán: sumerinstrument.com